VHH库生成

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VHH-Library-Generation

VHHs，也称为单域抗体或纳米抗体，是源自骆驼科动物（如羊驼、骆驼和骆驼）中发现的仅重链抗体的最小抗原结合片段。VHH抗体片段于1993年首次被发现，具有独特的特性，在治疗、诊断和研究工具中特别有利。这是由于它们的体积和结构小，除了它们的稳定性和与特定靶标高亲和力结合的能力外，还使它们能够穿透组织并到达对传统抗体可能具有挑战性的靶标。1

VHH库生成

有几种方法可以从骆驼科动物中分离出针对目标目标的 VHH，并建立用于筛选的文库，例如免疫文库、幼稚文库和合成/半合成文库。最常见的方法是对骆驼科动物进行免疫接种，并根据重链免疫球蛋白库建立一个文库。2,3具体流程如下：

  1. 骆驼科动物免疫：在2个月内，向骆驼科动物注射4至8次靶抗原。
  2. PBMC分离：采集外周血样本，分离外周血单核细胞。
  3. mRNA提取和逆转录：mRNA转化为cDNA。
  4. 噬菌体文库生成：PCR用于扩增VHH基因区域。
  5. 生物淘洗和文库筛选。
  6. 阳性克隆测序和序列分析。
  7. VHH表达和纯化。

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引用:

  1. Hamers-Casterman，C.，Atarhouch，T.，Muyldermans，S.，Robinson，G.，Hamers，C.，Songa，EB，Bendahman，N.和Hamers，R.（1993）。天然存在的抗体，不含轻链。自然，363（6428），446-448。https://doi.org/10.1038/363446a0
  2. Arbabi-Ghahroudi，M.（2022 年）。Camelid 单域抗体：作为挽救生命的治疗方法的前景和挑战。国际分子科学杂志，23（9）。https://doi.org/10.3390/ijms23095009
  3. Muyldermans，S.（2021 年）。指南：纳米抗体的生成和设计。Febs杂志，288（7），2084-2102。https://doi.org/10.1111/febs.15515
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